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數(shù)字PCR儀和標(biāo)準(zhǔn)PCR儀有什么區(qū)別?

更新時(shí)間:2021-10-27瀏覽:1401次
  數(shù)字PCR儀主要分為三大類(lèi):標(biāo)準(zhǔn)PCR(終點(diǎn)PCR)、實(shí)時(shí)定量PCR(qPCR)以及數(shù)字PCR(dPCR)。前兩者大家都很熟悉,而后者是這兩年冉冉升起的新星。
 
  數(shù)字PCR儀主要是產(chǎn)生大量的核酸序列供后續(xù)實(shí)驗(yàn)使用,比如測(cè)序、克隆,或僅僅是為了在凝膠上看看有沒(méi)有合適的條帶。
 
  qPCR則是實(shí)時(shí)定量靶序列,通常被用來(lái)測(cè)定生物分子的豐度,而不是生成終產(chǎn)物
 
  數(shù)字PCR儀也是定量的,但并非實(shí)時(shí)。反應(yīng)發(fā)生在大量的微小分區(qū)中。這些分區(qū)很小,其中每個(gè)可能包含0或1個(gè)DNA分子。通過(guò)計(jì)算陽(yáng)性反應(yīng)的數(shù)量,研究人員能夠真正定量DNA。這比qPCR更為靈敏,也不需要標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。
 
  對(duì)于標(biāo)準(zhǔn)PCR儀和定量PCR儀之間的選擇,研究人員通常都心里有數(shù)。不過(guò),說(shuō)到qPCR和dPCR之間的選擇,研究人員就沒(méi)那么有把握了,有時(shí)也需要幫助。這個(gè)選擇通常取決于研究人員的應(yīng)用和他們想要回答的問(wèn)題不過(guò)對(duì)于高通量應(yīng)用,qPCR則更實(shí)際。
 
  大多數(shù)用戶(hù)以96孔形式運(yùn)行PCR反應(yīng),通常使用0.2mlPCR管。當(dāng)然也還有其他形式,適合更高的通量或不同的樣品量,如0.5ml管。允許不同大小的PCR管插在同一模塊上。當(dāng)同一實(shí)驗(yàn)室中的不同人在進(jìn)行不同的PCR檢測(cè)時(shí),這特別有用。
 
  一些PCR儀允許樣品模塊更換成兩個(gè)或多個(gè)更小的模塊。這種模塊化的系統(tǒng)就好像多臺(tái)熱循環(huán)儀一樣,能提高效率。比比科技的雙模塊設(shè)計(jì)讓研究人員能夠在不同模塊上運(yùn)行不同的循環(huán)步驟。同樣,PCR儀包含四個(gè)熱模塊,能夠獨(dú)立運(yùn)行四個(gè)循環(huán)步驟。據(jù)介紹,這種設(shè)計(jì)帶來(lái)了靈活性,也明顯縮短了優(yōu)化時(shí)間。

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