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數(shù)字PCR儀在眾多領(lǐng)域中的應(yīng)用

更新時間:2021-09-27瀏覽:1348次
  數(shù)字PCR儀用于運行病毒檢測實驗,并對實驗數(shù)據(jù)進(jìn)行分析;儀器既可在實驗室內(nèi)操作,又可用于野外科學(xué)實驗,配合相應(yīng)試劑,對取自待檢測樣本的分析物或其他分析物中的目標(biāo)核酸進(jìn)行快速、準(zhǔn)確的定性檢測。
 
  數(shù)字PCR儀采用光、機(jī)、電一體化設(shè)計,配套具有自主知識產(chǎn)權(quán)的微流控芯片,可以將水相樣本快速制備成納升體積的液滴。液滴數(shù)與樣本體積相關(guān),30微升樣本可制備約5萬個液滴。液滴尺寸均一,并可在PCR擴(kuò)增后保持穩(wěn)定。
 
  應(yīng)用領(lǐng)域:
 
  1、基因表達(dá)
 
  通常可通過數(shù)字PCR儀來檢測不同細(xì)胞類型、組織和生物體在特定時間點的基因表達(dá)差異。首先,從目標(biāo)樣品中分離出RNA并將mRNA逆轉(zhuǎn)錄成cDNA。隨后,通過由PCR擴(kuò)增的cDNA數(shù)量,確定mRNA的初始水平。這一過程也被稱為逆轉(zhuǎn)錄PCR,RT-PCR。
 
  2、基因分型
 
  PCR可用于檢測特定細(xì)胞或生物體中等位基因的序列差異。例如,基因敲除和敲入小鼠等轉(zhuǎn)基因生物的基因分型[3]。引物對經(jīng)設(shè)計位于目標(biāo)區(qū)域側(cè)翼,可根據(jù)是否存在擴(kuò)增子及擴(kuò)增子長度來檢測遺傳變異。
 
  3、分子克隆
 
  PCR被廣泛應(yīng)用于目標(biāo)DNA片段的克隆,該技術(shù)被稱為PCR克隆。在直接PCR克隆中,DNA(如,gDNA、cDNA、質(zhì)粒DNA)的目標(biāo)區(qū)域被擴(kuò)增并插入到特殊設(shè)計的兼容載體中。
 
  4、醫(yī)學(xué)、法醫(yī)學(xué)和應(yīng)用科學(xué)
 
  PCR技術(shù)不僅可用于基礎(chǔ)研究,還適用于日常的臨床診斷、法醫(yī)學(xué)調(diào)查和農(nóng)業(yè)生物技術(shù)研究。這些應(yīng)用要求可靠的性能、靈敏度和嚴(yán)格的標(biāo)準(zhǔn)。因此,所使用的數(shù)字PCR儀和PCR試劑必須符合這些要求和目的。

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