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全自動(dòng)核酸純化儀在分子克隆技術(shù)中的應(yīng)用

更新時(shí)間:2022-03-16瀏覽:1019次
  全自動(dòng)核酸純化儀是應(yīng)用配套的核酸提取試劑來自動(dòng)完成樣本核酸的提取工作的儀器,核酸提取儀分為兩類:一類是大型的自動(dòng)化的,一般稱為自動(dòng)液體工作站;另一類是小型自動(dòng)核酸提取儀,利用封裝好的配套試劑自動(dòng)完成提取純化過程。
 
  大型自動(dòng)液體工作站因?yàn)樵O(shè)備成本高昂,運(yùn)行成本高,適合一次提取幾千個(gè)同一種類標(biāo)本,所以得到應(yīng)用的比較少;而小型自動(dòng)化的儀器,因?yàn)閮x器設(shè)備和運(yùn)行成本低,操作方便得到越來越多的應(yīng)用。
 
  核酸是生命的基本物質(zhì)之一,可分為DNA和RNA兩類,廣泛存在于動(dòng)物、植物細(xì)胞、微生物等所有生命體內(nèi)。不僅起著儲(chǔ)存和傳遞遺傳信息的作用,而且在蛋白質(zhì)的生物合成上也占重要位置,因而在生長、遺傳、變異等一系列重大生命現(xiàn)象中起決定性的作用。
 
  核酸提取包括DNA提取,RNA提取,質(zhì)粒提取。核酸是遺傳信息的攜帶者,是基因表達(dá)的物質(zhì)基礎(chǔ),是分子生物學(xué)研究的主要對象。無論是進(jìn)行核酸的結(jié)構(gòu)還是功能研究,首先都需要對核酸進(jìn)行提取和純化。
 
  在分子克隆的所有操作中,基本的操作是核酸的純化。其關(guān)鍵步驟是去蛋白質(zhì),通常只要用酚/氯仿。氯仿抽提核酸的溶液即可。每當(dāng)需要把克隆有某一些所用的酶滅活或去除以便進(jìn)行下一步時(shí),可進(jìn)行這種抽提。
 
  然而,如要從細(xì)胞裂解液等復(fù)雜的分子混合物中純化核酸,則要先用某些蛋白水解酶消化大部分蛋白質(zhì)后,再用有機(jī)溶劑抽提。這些蛋白酶包括鏈霉蛋白酶及蛋白酶K等,它們對多種天然蛋白均有活性,用酚氯仿抽提:這兩種有機(jī)溶劑合用,比單獨(dú)用酚抽提的除蛋白效果更佳。繼而用氯仿抽提則可除去核酸制品中的痕量酚。當(dāng)然,你也可以使用全自動(dòng)核酸純化儀來簡化你的工作。

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